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【干貨分享】關于大腸桿菌重組蛋白表達系統解答

大腸桿菌（E.coli）重組蛋白表達技術經過多年的發展，相對于其他表達體系，算是非常成熟的一個體系。大腸桿菌蛋白表達系統主要有以下特點：遺傳背景清楚；易于培養和控制；轉化操作簡單；表達水平高；成本低；周期短。本篇將對大腸桿菌重組蛋白表達系統的常見技術問題進行一一解答。1：大腸桿菌表達體系的優點是什么？（1）菌體繁殖速度快：20分鐘倍增一次，這意味著按照1/100的比例接種（MOI），只需要幾個小時培養基細菌即可到達穩定期；（2）容易實現高密度培養：理論培養密度是1×1013c...

【技術服務】常規小鼠源多克隆抗體定制服務

多克隆抗體血清制備抗體的產生，是圍繞B淋巴細胞的激活與分化為漿細胞進行的。在shou次免疫過程中，抗原首先經多種免疫相關淋巴或巨噬細胞吞噬充分暴露抗原，并將抗原呈遞給靜止B淋巴細胞，以使其活化，活化后的B淋巴細胞轉化為漿細胞，也就是抗體的產生者。由于抗原的表面存在多種抗原識別決定簇，因此在經過免疫相關細胞加工后，呈遞給B淋巴細胞的抗原決定簇也是多種多樣的,理論上,-個B淋巴細胞只接受-種抗原決定簇,產生-種對應與之結合的抗體,多個B淋巴細胞就會產生多種識別抗原不同抗原決定簇(...

安諾倫代理品牌Lumiprobe——高品質活性熒光染料供應商

LumiprobeCorporation品牌logoLumiprobeCorporation是美國一家高品質生物技術公司，專業提供分子生物學研究用的活性熒光染料。從2006年起，公司開始生產并銷售生命科學研究和診斷學應用的優質化學藥品。主要產品有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreenI染料，定制合成熒光雙標記引物。產品主要應用：點擊化學（CLickChemistry）、蛋白質組學研究中的雙向熒光差異凝膠電泳（2DDIGE）和實時熒光定量PCR（ReaLtim...

重組蛋白質的表達、純化、復性和定量

按操作手冊進行，具體步驟如下。一、重組蛋白質的誘導表達1.挑取轉化有質粒的單菌落，接種于3ml選擇性LB液體培養基中，37oC，250rpm/min振搖培養過夜。2.次日將培養過夜的菌液500μl再接種于10ml（1:::20）選擇性LB液體培養基中，37oC，250rpm/min振搖培養至光密度（OD600=0.6）時，取1ml樣本作為誘導前標本，10000g離心1min收集菌體沉淀，－20oC凍存備用。3.加入1mol/LIPTG于菌液中，使IPTG終濃度為1mM，37o...

拿來吧你，拯救你的重組蛋白

重組蛋白是應用了重組DNA或重組RNA技術而獲得的蛋白質。用于生產重組蛋白的宿主細胞主要是細菌（大腸桿菌）、哺乳動物細胞、昆蟲細胞和酵母。重組蛋白已被廣泛應用于蛋白結構研究、免疫檢測試劑、重組蛋白藥物、診斷試劑開發、抗體藥物靶點、CAR-T細胞治療靶點、Fc受體、流感病毒蛋白和細胞因子等大多數熱門研究領域。那大家在進行重組蛋白表達時不知道會不會糾結這些問題：該選擇什么表達系統？蛋白產量怎么才能有所提高？接下來帶你們了解一些常見的外源基因表達系統（包括原核、真核表達系統）以及一...

新手小白細胞轉染的注意事項

轉染可謂是做生物學實驗的大家經常會考慮的一項實驗技術，大致原理也都是明白的。但是在實驗時經常會遇到轉染效率太低，以至于無法進行后續的實驗。到底轉染是什么呢？為什么轉染效率不高呢？其實轉染，就是在真核細胞里導入具有生物功能的核酸，并在細胞中維持其生物功能。轉染方法的選擇我們熟知且常用的轉染方法主要有物理介導，化學介導，生物介導。物理介導方法：電穿孔法、顯微注射和基因槍；化學介導方法：如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術；生物介導方法：有較為原始的原...

安諾倫銷售代理Leading Biology產品試劑*......

BIRC8/ILP2Antibody(N-Terminus)|LBP65960|LeadingBiology品牌LeadingBiology貨號LBP65960產地美國價格面詢保存條件:存儲在2-8°C2周，長期存儲20°C,防止凍融循環。英文名:BIRC81ILP2Antibody(N-Terminus)供應商:安諾倫(北京)生物科技有限公司規格:50ug商品分類:多克隆抗體產品概述:ProtectsagainstapoptosismediatedbyBAX.靶點/蛋白:s...

技術服務|大鼠源單克隆抗體定制服務

單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的免疫動物脾細胞(如小鼠B淋巴細胞)和具有永生功能的腫瘤細胞(如小鼠骨髓瘤細胞)。被特異性抗原免疫的免疫動物脾細胞(B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體能夠分泌產生結合抗原特定位置(表位)的抗體,但其自身不能在體外連續培養，具有永生功能的腫瘤細胞(骨髓瘤細胞)則可在培養條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下，只賄由一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤...