噬菌體篩選技術(shù)的核心在于將外源基因插入噬菌體的結(jié)構(gòu)基因中，使其隨著噬菌體的傳代而表達(dá)。在不影響噬菌體外殼蛋白正常功能的前提下，外源蛋白以融合形式展示在噬菌體表面。這種展示方式使得外源蛋白能夠保持其相對(duì)獨(dú)立的空間構(gòu)象和生物活性，有利于靶分子的特異性識(shí)別及結(jié)合。
 

　　噬菌體篩選策略對(duì)于獲得高親和力的抗體至關(guān)重要。常見的篩選策略包括負(fù)向篩選、競(jìng)爭(zhēng)篩選和交叉篩選等。
 

　　1.用于去除非特異性結(jié)合的克隆。例如，在使用鏈霉親和素磁珠對(duì)生物素化蛋白進(jìn)行篩選之前，可以將文庫預(yù)先與鏈霉親和素磁珠和生物素化非目標(biāo)蛋白結(jié)合，以減少不需要的結(jié)合物的比例。
 

　　2.在靶抗原和非靶抗原同時(shí)存在的情況下進(jìn)行篩選，增加結(jié)合靶抗原特異性表位的抗體比例。
 

　　3.在不同輪次之間交替使用抗原進(jìn)行篩選，以得到具有交叉反應(yīng)的抗體。
 

　　噬菌體篩選的主要應(yīng)用領(lǐng)域：
 

　　1.抗原表位分析：通過噬菌體展示技術(shù)可以篩選出抗原的表位，為疫苗設(shè)計(jì)和免疫治療提供重要信息。
 

　　2.單克隆抗體的制備：利用噬菌體展示技術(shù)可以快速獲得高親和力的單克隆抗體，用于疾病診斷和治療。
 

　　3.抗體人源化：通過該技術(shù)可以獲得人源化抗體，減少異源抗體在臨床應(yīng)用中的免疫排斥反應(yīng)。
 

　　4.藥物篩選：噬菌體展示技術(shù)可用于篩選新的藥物候選分子，特別是在治療性抗體的開發(fā)中發(fā)揮重要作用。
 

　　5.疫苗研制：通過篩選具有高親和力和高特異性的抗原表位，可以設(shè)計(jì)出更有效的疫苗。