表面等離子共振（SPR）技術(shù)實驗步驟主要包括以下幾個階段：

配體的固定：首先需要將待測分子（配體）固定在傳感器芯片表面。這通常通過共價偶聯(lián)或物理吸附實現(xiàn)，偶聯(lián)條件（如pH值）需要優(yōu)化以確保配體的穩(wěn)定性和活性 。

樣品的準(zhǔn)備：分析物（如蛋白質(zhì)、小分子等）需要以適當(dāng)濃度和體積準(zhǔn)備，以確保能夠與芯片表面的配體有效結(jié)合 。

樣品進(jìn)樣：將含有分析物的溶液通過微流控系統(tǒng)流過傳感器芯片表面，配體與分析物之間的相互作用會導(dǎo)致SPR角度的變化，這一變化被儀器實時監(jiān)測并記錄 。

數(shù)據(jù)采集：在分析物與配體結(jié)合及隨后的解離過程中，儀器會記錄SPR信號的變化，這些數(shù)據(jù)反映了分子間的相互作用特性 。

芯片再生：實驗結(jié)束后，需要使用適當(dāng)?shù)娜芤海ㄈ缢嵝曰驂A性溶液）清洗芯片，以去除殘留的分析物，恢復(fù)芯片表面，為下一輪實驗做準(zhǔn)備 。

數(shù)據(jù)分析：通過分析軟件處理實驗過程中獲取的SPR信號，可以計算出分子間的結(jié)合親和力、動力學(xué)參數(shù)等，從而得到有關(guān)生物分子相互作用的詳細(xì)信息 。

實驗優(yōu)化：根據(jù)實驗結(jié)果調(diào)整樣品濃度、流速等參數(shù)，以獲得更準(zhǔn)確的實驗數(shù)據(jù) 。

SPR技術(shù)因其無需標(biāo)記、實時監(jiān)測、靈敏度高等特點(diǎn)，在藥物篩選、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究、抗體-抗原結(jié)合等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用和重要價值 。

復(fù)制再試一次分享